微生物（PEPCase）試劑盒（ELISA）

產品簡介：

樣本類型：血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本

檢測方法：雙抗夾心法

儲藏及保存：2-8度，6個月

檢測原理：

將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體，將未結合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

產品內容：

實驗所需儀器及設備：

實驗操作流程：

第一步：試劑盒室溫平衡 30min ，然后從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

第二步：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL。

第三步：樣本孔中加入待測樣本 50μL；空白孔不加。

第四步：除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

第五步：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

第六步：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

第七步：每孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 O.D 值。

注：

微生物（PEPCase）試劑盒（ELISA）

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

為了幫助您更好地解決在實驗中可能碰到的各種問題，我們設計了這些問題指導，配以試劑盒內的說明書一起供您參考使用。很多因素都將導致免疫測定實驗的失敗，而大多數技術失誤是可以通過全面閱讀和準確理解說明書以及實驗步驟來避免的。若對試劑盒內的說明書有任何意見和建議，歡迎反饋。我們期待聽到您的聲音，從而完善我們的產品，更好地為您服務。
◆ 仔細閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全（數量、體積）
◆ 標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。
短期內無法實驗者，注意低溫保存
◆ 準備好所有實驗額外所需物品， （比如移液器，試管，清洗器， 酶標儀）
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據檢測標本數量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內每種試劑的貯存條件，保證所有試劑均按照試劑盒內說明書推薦的條件存儲。
◆ 檢查不穩定或者變質的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑，比如標準品稀釋液或者檢測稀釋液，可能在設計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標板之前，必需充分混勻。而由于沉淀物的特性，在加入酶標板之前，必需不停攪拌。
◆ 保證充分的孵育時間和溫度。
◆ 切勿使用不同生產批號的試劑取代現有試劑或混合現有試劑。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液時，避免泡沫產生。
◆ 在實驗開始之前，安排好實驗流程。
◆ 在實驗開始之前，清潔工作臺。
◆ 若有問題，應與我公司或代理商進行溝通。