微生物蔗糖磷酸化酶（SPase）ELISA試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

樣本類型：血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本

檢測(cè)方法：雙抗夾心法

儲(chǔ)藏及保存：2-8度，6個(gè)月

檢測(cè)原理：

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體，將未結(jié)合的抗體洗凈后再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

產(chǎn)品內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)所需儀器及設(shè)備：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

第一步：試劑盒室溫平衡 30min ，然后從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

第二步：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL。

第三步：樣本孔中加入待測(cè)樣本 50μL；空白孔不加。

第四步：除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

第五步：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。

第六步：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

第七步：每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 O.D 值。

注：

微生物蔗糖磷酸化酶（SPase）ELISA試劑盒

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

ELISA實(shí)驗(yàn)前的注意事項(xiàng)
為了幫助您更好地解決在實(shí)驗(yàn)中可能碰到的各種問題，我們?cè)O(shè)計(jì)了這些問題指導(dǎo)，配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用。很多因素都將導(dǎo)致免疫測(cè)定實(shí)驗(yàn)的失敗，而大多數(shù)技術(shù)失誤是可以通過全面閱讀和準(zhǔn)確理解說明書以及實(shí)驗(yàn)步驟來避免的。若對(duì)試劑盒內(nèi)的說明書有任何意見和建議，歡迎反饋。我們期待聽到您的聲音，從而完善我們的產(chǎn)品，更好地為您服務(wù)。

◆ 仔細(xì)閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期，請(qǐng)勿使用。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）
◆ 標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。
短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存
◆ 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品， （比如移液器，試管，清洗器， 酶標(biāo)儀）
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件，保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲(chǔ)。

試劑盒的儲(chǔ)存及有效期：                          

未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。

使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕

客戶常見問題解答：

你們ELISA試劑盒采用的是什么原理方法？需要用什么儀器來測(cè)定？?jī)x器設(shè)定波長(zhǎng)多少nm?

茁彩生物回答：一般采用酶聯(lián)免疫分析（包括夾心法，間接法，競(jìng)爭(zhēng)法），需要酶標(biāo)儀，儀器波長(zhǎng)450nm

2、處理血漿樣本的時(shí)候可以選擇哪些抗凝劑？（至少兩個(gè)）

茁彩生物回答：處理血漿樣本的時(shí)候可以用 EDTA、肝素、檸檬酸鈉等抗凝劑

3、不同批次的試劑盒能不能混用？為什么？

茁彩生物回答：不建議混用，因?yàn)椴煌卧噭┖兄g存在批間差

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